作者：小编 日期：2026-02-03 00:24:22 点击数：
![精品]虫草深层发酵的培养条件和培养基优(图1)](https://www.feipinzhan.com/file/upload/202406/04/1330505211671.jpg)
江苏农业科学2008 年第 6 期 一 85 一 虫草深层发酵的培养条件和培养基优化研究 刘小莉， 周剑忠， 王 ( 江苏省农业科 学院农产 品加 工研究所 ， 江苏南京 211 3 014 ) 英， 李 剑， 黄开红 摘要 ： 以菌丝体干重 、 腺苷含量及腺苷总量为指标， 研究温度、 初始 pH 值 、 碳源 、 氮源和金属离子等因素对蛹虫草液体培养的影响。 结果表明， 蛹虫草液体摇瓶培养的最佳温度为20 ℃ ， 初始 pH值为4． 0 ， 最适培养基组成为糖蜜20 g／ L 、 玉米浆 l O g／ L、 氯化钙 0． 5 g／ L 、 磷酸二氢钾 0． 5 g／ L 、 磷酸氢二钾 0． 5 g／ L 、 维生素 B。 0． 1 g／ L。在优化的培养条件下， 蛹虫...
江苏农业科学2008 年第 6 期 一 85 一 虫草深层发酵的培养条件和培养基优化研究 刘小莉， 周剑忠， 王 ( 江苏省农业科 学院农产 品加 工研究所 ， 江苏南京 211 3 014 ) 英， 李 剑， 黄开红 摘要 ： 以菌丝体干重 、 腺苷含量及腺苷总量为指标， 研究温度、 初始 pH 值 、 碳源 、 氮源和金属离子等因素对蛹虫草液体培养的影响。 结果表明， 蛹虫草液体摇瓶培养的最佳温度为20 ℃ ， 初始 pH值为4． 0 ， 最适培养基组成为糖蜜20 g／ L 、 玉米浆 l O g／ L、 氯化钙 0． 5 g／ L 、 磷酸二氢钾 0． 5 g／ L 、 磷酸氢二钾 0． 5 g／ L 、 维生素 B。 0． 1 g／ L。在优化的培养条件下， 蛹虫草菌丝体生物量为 15． 55 g／ L ， 腺苷含量为 6． 26 mg／ g， 腺苷总量为97 ． 25 mg／ L 。 关键词： 蛹虫草 ； 腺苷 ； 生物量； 液体发酵 中图分类号： TS201． 21 文献标志码： A 文章编号： 1002 1302 (2008 )06 0085 02 虫草是我国特有的名贵药用线 m 的高山草甸土层中， 具有扩张气管、 镇静、 抗心律失 常、 降血压、 抗病原微生物 、 抗恶性肿瘤等多种药理活性u 由于生长环境和寄生条件特殊， 再加上人们不断采挖， 环境不 断遭到破坏， 虫草天然资源非常紧张 致力于虫草菌丝体的人工培养， 通过液体深层发酵培养可以 快速生产食药用真菌菌丝体， 缩短传统固体培养时间， 节约生 产成本 。目前国内市场上出现了较多的人工培养菌丝体 产品， 如金水宝胶囊、 百灵胶囊等， 但这些产品说明中仅标明 菌粉含量 ， 而无具体的特征性有效成分的标志 腺苷、 虫草素等核苷类成分是虫草中主要成分， 且腺苷是 虫草素的直接前体 J 。本试验以液体发酵虫草菌丝体产量 及其中腺苷的含量为指标， 研究虫草液体发酵的最适培养条 件和培养基组成。 。 。因此， 国内外一直 。 1材料与方法 1． 1材料 和试 剂 蛹虫草( Cordyceps militaris) C 一 8 菌株为本研究室保存。 种子培养基： 土豆葡萄糖液体培养基 ， 土豆200 g， 葡萄糖 20 g， KH2PO 0． 5 g， MgSO4 1 g， 维生素 Bj 0． 1 g， 水 l 000 ml 。 发酵培 养基： 葡萄糖 20 g， 酵母 膏 5 g， 蛋 白胨 5 g， K2HPO4 0． 5 g， KH2 PO4 0． 5 g， MgSO 0． 5 g， 维生素 Bl 0． 1 g， 水 1 000 ml 。 1． 2 1． 2． 1 基中， 2O o C 、 120 r／ r ain 黑暗培养 6 d， 作为种子液， 按 10％接 种量接种于发酵培养基， 20 ℃、 120 r／ min 黑暗培养 4 d。 1． 2． 2菌丝生长量测定虫草培养物于4 000 r／ min 离心 15 m in 得菌丝体， 以去离子水洗涤 3 次， 将菌丝体冷冻干燥至恒 重 ， 称重。 方 法 菌种活化和培养 虫草新 鲜菌丝块 接种于种 子培养 收稿 日期 ： 2008 06 16 基金项 目： 江苏省农业 科学院科 研基 金( 编号 ： 6510723) 。 作者简介： 刘小莉( 198l 一) ， 女， 江苏泰兴人， 博士， 助理研究员， 主要 从事食品微 生物及 生物技术研究 。Tel ： ( 025) 84391571；E mail ： liuxl 1981@ y ahoo． cor n ． Cil。 通讯作者 ： 黄 开红 ， 研 究 员 ， 主要 从 事 生 物 技 术 研 究。E mail ： jaashuang@ hotmail． COr n o 1． 2． 3法 纯净水 ， 超声波 100 W 、 60 ℃处理 50 r a in， 12 000 r／ r a in 离心 10 r ain 取上清， 重复提取 3 次， 上清合并过 0． 45 行高效液相色谱检测。色谱条件 ： 色谱柱 ZORBAX SB C18 (4． 6 mm×250 mm， 5 I xm) ； 柱温 30 o C ； 进样量 20 FL 1； 流动相 ： 水 一甲醇 (85 ： 15) ， 流速 1 ml／ min； 检测器波长 260 llm。 1． 2． 4数据分析试验数据采用 SPSS 13． 0 软件进行显著 性方差分析( 0c=0． 05) 。 菌丝体中腺苷 的检测 。菌丝体加液氮研磨成粉末， 称取粉末 0． 05 g 加入 2 ml 采用改良的高效液相色谱 m滤膜后进 2结果 2 ． 1最 适 温 度 蛹虫草C 一8 菌株在 l5 30 ℃下均能生长 ， 但20 ℃下菌 丝生长量和腺苷含量显著高于其他温度条件( 表 1) 。因此， 选择 C 一 8 菌株最适培养温度为2O ℃。 表 1 不同温度条件对菌体 生长和产物的影响 2． 2培 养基初始 pH 值 蛹虫草 C 一8 菌株能适应较宽的 pH 值范围， 在 pH 值 2 ～1 1范围内均能生长。但菌丝生长量和腺苷含量的变化趋 势明显不同。随着 pH 值的增大， 菌丝生长量和腺苷含量均 呈现先增大后减少的趋势， 但在 pH 值为6 时， 菌体干重达到 最高， 而腺苷含量在 pH 值为 4 时最大( 表 2) 。综合考虑， 当 pH 值为4 时， 菌株的单位体积发酵液所含菌丝体中的腺苷总 量最高， 因此选择培养基初始 pH 值为4。 2． 3碳 源的选择 分别选 2O g／ L 葡萄糖、 蔗糖、 乳糖、 糖蜜、 可溶性淀粉 、 B 一环糊精和自糠作碳源， 基础培养基中其他组分不变。结果 显示 ， 以 白糠 作 为碳 源 时 菌丝 体 中腺 苷 含 量较 高， 达 (5． 70 0． 15) m g／ g， 与葡萄糖作为碳源时的最高水平(5． 72 0． 32) mg／ g 没有显著差异， 但菌丝生长量极低。以环糊精 作为碳源时菌丝生长量和腺苷含量均为最低。以糖蜜为碳源
2024-10-27
2024-11-26
2024-10-21
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